为什么使用Exoid？TRPS技术在EV与纳米颗粒单颗粒表征中的四大优势

摘要：本文基于IZON Science高级科学家发表在IZON官网的研究数据，系统阐述Exoid和TRPS技术的四大核心优势，为EV及纳米医学研究者提供技术选型参考。

关键词：外泌体、细胞外囊泡、Exoid、TRPS、Zeta电位、单颗粒表征、纳米颗粒、可调电阻脉冲传感、粒径分析、纳米药物

在细胞外囊泡、脂质纳米颗粒及病毒载体等生物纳米颗粒研究领域，颗粒的粒径、浓度和Zeta电位是决定其生物学功能与药物递送效率的关键质量属性。然而，“用什么技术来测量”这一问题，长期困扰着许多研究者。

IZON Science自2008年起深耕纳米颗粒分析领域，其核心产品Exoid搭载的可调电阻脉冲传感（Tunable Resistive Pulse Sensing，TRPS）技术，凭借单颗粒级别的物理测量原理，可直接测得颗粒真实粒径、浓度与Zeta电位，突破光学类检测手段的固有局限，为细胞外囊泡等生物纳米颗粒提供高分辨率、可溯源的单颗粒表征方案。相关产品与技术资料可参考iZON Exoid与纳米颗粒分析资料。

以下结合IZON官网发表的研究数据，整理选择Exoid的四大理由。

一、TRPS技术原理速览：为什么它能做到“逐个测量”？

在介绍四大理由之前，先简单介绍Exoid的核心技术TRPS，也就是Tunable Resistive Pulse Sensing，可调电阻脉冲传感。

图1. TRPS工作原理示意图

TRPS的测量原理基于物理阻抗变化，而非光学信号。首先，将待测纳米颗粒悬浮于PBS等电解质溶液中；随后，颗粒在外加压力驱动下逐个通过可调节孔径的纳米孔；当颗粒穿过纳米孔时，会取代部分电解液，导致孔内离子电流出现瞬间阻断（Blockade）；设备进一步对这些阻断信号进行解码，其中阻断信号幅度与颗粒体积成正比，可得出粒径，阻断信号频率可得出颗粒浓度，阻断信号持续时间反映颗粒运动速度，可得出颗粒Zeta电位。每次测量均使用与美国国家标准与技术研究院（NIST）追溯的标准校准颗粒进行比对，以确保数据可重复、可比。

图2. Exoid单颗粒表征系统

TRPS不依赖颗粒或分散剂的光学性质先验知识。这意味着，颗粒折射率未知或溶液略有颜色时，TRPS仍可从电学阻断信号角度进行测量，这也是其与光学检测技术形成互补的重要原因。

二、选择Exoid的四大理由详解

理由1：准确性高——Exoid“看得清”

准确性是纳米颗粒表征的重要准则。原文中使用一组四模态标准品，也就是含四种粒径颗粒的混合物，对TRPS、NTA和MADLS（多角度动态光散射）进行了比较。

图3. TRPS、NTA与MADLS在四模态样品中的颗粒分辨能力。图片改编自Vogel等人的相关研究数据。

TRPS可清晰呈现四个颗粒群，并实现基线分离，能够准确识别每一个亚群；NTA漏掉了一个颗粒群，并将其他颗粒群混在一起，分辨率不足；MADLS只能模糊感知到四个颗粒群中间可能存在一些信号，但无法分辨独立亚群。这个结果提示，在纳米药物开发中，聚集体可能导致免疫原性反应；在EV标志物研究中，漏掉亚群可能意味着丢失关键生物学信息。因此，Exoid的准确性并不是锦上添花，而是复杂纳米颗粒表征中的关键能力。

理由2：逐颗粒测量——从“群体平均”到“单颗粒表征”

Exoid仅需35 μL样品体积，即可实现逐颗粒（particle-by-particle）的粒径和Zeta电位分析。更重要的是，系统可以导出每一个颗粒的原始数据，便于进行统计学比较。

图4. Exoid单颗粒分析能力

图4中，A展示三模态样品中通过尺寸和浓度测量清晰显示三个独立颗粒群；B展示通过尺寸和Zeta电位测量显示三模态样品中的不同亚群；C展示B中不同亚群的原始逐颗粒Zeta电位数据；D展示颗粒装载核酸后粒径变化；E展示颗粒装载DNA后Zeta电位变化。逐颗粒分析能力在多种研究中已经展现出价值，例如纳米载药监控可通过追踪每个颗粒装载药物前后的尺寸和浓度变化评估装载效率，异质亚群区分可在多分散EV样本中通过尺寸与Zeta电位双参数散点图无标记可视化不同亚群，统计分析则可在导出单颗粒数据后对整个样本或样本内不同亚群进行比较。

理由3：实时动态分析——见证颗粒的“此时此刻”

Exoid样品在测量过程中是开放可及的。Exoid的设计将待测样品置于上流体池中，一旦打开设备盖子，样品即可自由接触。这意味着研究者可以直接在测量孔中向样品添加试剂，并实时追踪颗粒变化。

图5. Exoid实时动态分析

图5中，A展示添加表面修饰剂或装载货物时测量颗粒实时变化的两个简单步骤；B展示按步骤A添加DNA后颗粒Zeta电位的实时下降数据。该能力的实际应用价值较高，例如可用于纳米装载过程监控。利用此功能实时监控DNA装载到磁性纳米颗粒上的过程时，可以观察到颗粒Zeta电位随DNA装载而持续下降，从而计算装载效率和时间窗口。

理由4：可调性——灵活适配从EV到微生物的全尺度测量

TRPS中的“T”代表Tunable，也就是可调。这是Exoid区别于固定孔径设备的核心设计理念。可调性主要体现在两个层面：一是多纳米孔尺寸可选，二是选定纳米孔后仍可通过拉伸调节进一步优化测量条件。

表1. Exoid纳米孔检测范围和适配样本

选定一种纳米孔后，还可通过Exoid自动化系统将纳米孔拉伸到不同孔径宽度，无需更换纳米孔即可优化不同尺寸颗粒的测量条件。这意味着一种纳米孔可以覆盖跨越数倍的尺寸范围，提升操作灵活性和效率。

图6. Exoid可调性的应用

图6中，A展示使用TRPS测量携带SARS-CoV-2 siRNA的小型脂质纳米颗粒；B展示使用TRPS测量大型游动孢子。这也说明TRPS的应用对象并不局限于外泌体，还可覆盖更宽范围的纳米颗粒和微米级颗粒样本。

三、Exoid应用场景

Exoid的宽量程和高分辨率使其可以应用在多个前沿领域。在细胞外囊泡和外泌体研究中，Exoid可用于获取EV真实浓度与尺寸分布，为标志物发现和液体活检提供数据基础；也可用于监测疾病进展或储存条件对EV Zeta电位的影响；还可高分辨率识别EV异质亚群，例如外泌体、微囊泡和脂蛋白颗粒，且无需荧光标记；与qEV纯化柱联用时，也可形成“分离—表征”的标准化闭环，满足EV研究中对正交验证的需求。

在脂质纳米颗粒和脂质体研究中，Exoid可用于高分辨率捕捉LNP装载mRNA或siRNA前后的微小尺寸变化，也可评估LNP制剂的聚集行为和冻融稳定性。由于Exoid可检测到大聚集体，因此适合用于纳米制剂稳定性和处方筛选。

在病毒与病毒样颗粒研究中，Exoid可用于定量测量总病毒颗粒浓度，为基因治疗和疫苗开发中的病毒载体提供质量控制数据；同时也可检测缺陷干扰颗粒（Defective Interfering Particles，DIPs）等影响病毒载体质量但容易被忽视的颗粒亚群。

在纳米药物递送系统中，Exoid可为纳米级药物产品提供粒径、浓度和Zeta电位三合一测量方案，并可实时监控药物装载效率，从而缩短处方筛选周期。

关于IZON Science

IZON Science成立于2008年，总部位于新西兰，是纳米颗粒分离与分析解决方案相关企业，同时布局外泌体纯化和外泌体单颗粒表征等技术方向，并通过ISO 13485认证。其产品体系覆盖qEV系列外泌体纯化柱、自动化纯化系统以及Exoid/Pulsoid等纳米颗粒分析设备。对于外泌体与纳米颗粒研究团队而言，IZON体系的价值不仅在于单一设备，也在于可从样本分离、纯化到单颗粒表征建立连续技术路径。

参考文献

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9. Timms K. 4 Reasons Why You Should Be Using the Exoid. IZON Science News. 2024.

声明

本文内容基于IZON Science官网公开发表的技术文章及同行评审文献编写，原文为Kate Timms, PhD. “4 Reasons Why You Should Be Using the Exoid.” IZON Science, 2024，旨在为科研工作者提供技术信息分享与解读，不构成医疗建议或商业承诺。文中数据来自公开文献和技术资料，具体产品信息以IZON Science官方发布资料为准。

关于技术来源

本文基于IZON Science公开资料及相关文献信息曼博生物整理，用于科研信息分享、实验参考和TRPS单颗粒纳米颗粒表征技术理解。Exoid应用涉及颗粒类型、粒径范围、浓度区间、纳米孔型号、纳米孔拉伸条件、Zeta电位检测、实时动态分析、单颗粒数据统计、qEV分离纯化流程和多技术正交验证等多项变量，实际应用前仍需结合具体实验条件进行验证。

本文围绕IZON Science Exoid、Pulsoid、TRPS可调电阻脉冲传感、qEV系列外泌体纯化柱、自动化纯化系统、EV表征、LNP脂质纳米颗粒、病毒载体、VLP和纳米药物递送系统等方向提供产品信息与技术资料支持。本文不作为临床应用建议，仅供科研与实验流程参考。